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                   2008年3月6日

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飼料常用發酵菌種的菌落形態

2010/4/22 13:55:37   文章來源:原創   作者:強微生物   瀏覽次數:34353
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    飼料發酵中常用的幾個菌種如乳酸菌(桿菌類、球菌類等產乳酸菌的總稱)、酵母菌(特別是產朊假絲酵母菌,非常適用于轉化非蛋白氮,生成菌體蛋白,發酵力強)、芽孢桿菌(特別是枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌等),我們特別將這幾種菌種分類培養于平板,讓大家觀賞學習,同時,也檢測了國內幾個有點影響的同類產品,問題非常多,結果讓人震驚,與其包裝上標的的活菌含量相差懸殊,懸殊到讓人不可思議,其中不乏名牌公司產品。當然,為了避免不必要的麻煩,公司不打算在此公開這些產品名稱:這里僅為供大家學習的圖片,不久我們也將公布詳細的檢測方法。

    1、乳酸菌
     普通的光學顯微鏡是無法看得到乳酸菌這么小的細菌的,即使是在16(目鏡)*40(物鏡)的條件下,也只能看到大概的乳酸桿菌,而乳酸球菌更難看到,更不用說菌種鑒定了,即使是使用油鏡觀測(同時進行細胞染色處理),雖然可以看得更為清楚一些,但一是一般人無法操作,二是仍然不能準確鑒定,唯一比較簡單的鑒定方法還是平板培養法,利用乳酸菌產乳酸的特點,在培養皿上形成透明圈的特點來鑒定它。
     在乳酸菌專用培養基MRS培養基上,于30度培養72小時,菌落小,呈白色,形態有圓形(培養皿底部)和長條形(鑲嵌在培養基中部),直徑1.0,長度2.5毫米左右,無細胞色素。由于培養基中加入了碳酸鈣,所以,菌落周圍會開成一圈透明圈,而別的菌種不會形成透明圈。
     透明圖不容易看到,需要放在比較深顏色的桌子上看,或者看平板的背面,對著光線看,則比較容易看清楚:
     下面是在深色桌子上看的結果:可以看到菌落的周圍,是一圈透明的,這是因為乳酸菌產乳酸,把碳酸鈣混懸濁液中和成可溶解性的乳酸鈣的結果,這也說明乳酸菌發酵的糟渣飼料,或活力99生酵劑發酵的保健液等來喂養畜禽,可以提高飼料中鈣磷和微量元素的消化吸收率。


      下面是對著光看的圖片,透明圈則看得比較清楚了:




    2、產朊假絲酵母菌
        挑取假絲酵母菌鏡檢操作:酵母菌可以在普通的光學顯微鏡下,能非常容易地找到它,最簡單的原因是因為它比乳酸菌等細菌大了近10倍,顯微鏡下呈圓形或橢圓形,非常明顯,即使是獸醫店中的光學顯微鏡也能找到它,活力99生酵劑中的酵母菌(取1克活力99粉劑,用100毫升水溶解,滴一小滴于載玻片上涂片)在普通光學顯微鏡下是密密麻麻的(根本找不到沒有酵母細胞的間隙),非常之多似千軍萬馬,非常漂亮也讓人震憾(相比之下很多同類產品幾乎連很容易找得到的酵母菌都看不到,或只是鏡頭視野中稀稀落落的幾個),但細菌在普通光學顯微鏡下看不到,這也是為什么我們有些用戶打電話來說,在顯微鏡下為什么只看得到酵母菌,而看不到細菌的原因(如前所述,細菌并不容易看到,必須用平板培養的方法才能準確鑒定和檢測到)。

     產朊假絲酵母菌菌落形態
      馬鈴薯葡萄糖培養基上30℃培養48小時,菌落呈乳白色,表面光滑濕潤,有光澤,邊緣整齊或菌絲狀;生長在培養皿底部的菌落呈圓形,大小5毫米左右,生長鑲嵌在瓊脂培養基中間的,則呈梭形、菱形、四角形等不規則形態,且菌落更小,只有3毫米左右。
     注意事項
      特別一提的是:由于是先注入菌體懸液,后注入培養基,所以,大多數菌落都長在培養皿的底部,少數菌落長在瓊脂培養基中間(鑲嵌在瓊脂培養基中間),極少數長在瓊脂培養基表面,造成同一菌種可能菌落形態有所不同,如下:
      產朊假絲酵母:長在培養皿底部的,呈乳白色圓形菌落狀態,大小約5毫米左右;鑲嵌在瓊脂培養基中間的則往往呈梭形、菱形、四角形等不規則形態,且菌落更小,只有3毫米左右,但顏色都是乳白色;無論是長在培養皿底部的,還是鑲嵌在瓊脂培養基中間的,用接種環插入菌落中間,再涂布在滴有一滴水的載玻片上,用16(目鏡)×40(物鏡)進行觀察,可以看到典型的酵母菌細胞(圓形或橢圓形大細胞);

   3、枯草芽孢桿菌
      營養肉汁瓊脂培養基上30培養36小時,菌落表面粗糙,直徑25毫米,不透明,無光澤,邊緣不整齊有傘狀皺褶,擴張,污白色或微黃色
    枯草芽孢桿菌也是細菌一種,在普通光學顯微鏡下也較難看到,非常典型的菌落形態,只能在平板培養中觀察到。
從下圖可以看到明顯的枯草芽孢桿菌菌落形態,傘狀、和皺褶的特點非常明顯;
圖一:從自然界塘底泥分離的枯草芽孢桿菌菌落:

     活力99生酵劑中的枯草芽孢桿菌菌落:(同樣檢測了幾個同類產品,結果均為0個菌落)





4、地衣芽孢桿菌
     地衣芽孢桿菌是兼性厭氧細菌,產芽孢,而高溫強酸強堿等環境,分泌抗生素是其特點之一,下圖為營養瓊脂培養的地衣芽孢桿菌:
      大菌落為接觸空氣的平板表面長的菌落,極小的微小菌落為鑲嵌在培養基內部產生的菌落,由于地衣芽孢桿菌為兼性厭氧菌,所以,在培養基內部缺氧環境中也能生長,只是長得慢和小一些而已,這一點與枯草芽孢桿菌有所不同。